PCR實驗臺裝修要求
Pcr實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)的簡稱。是一種分子生物學技術，用于放大特定的DNA片段， 可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達納米級別，精確檢測乙肝病毒在患者體內(nèi)存在的數(shù)量、
是否復制、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗依據(jù)。
那么如何建設一個PCR實驗室的裝修建設標準?現(xiàn)在有請SICOLAB責任人來給大家介紹下
一、主體結構
主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結構牢固，線條簡明，美觀大方，密封性好。
二、標準的三區(qū)分隔和氣壓調節(jié)
將PCR過程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增檢測三個獨立的實驗區(qū)。整個區(qū)域有一個整體緩沖走廊。每個獨立實驗區(qū)設置有緩沖區(qū)， 同時各區(qū)通過氣壓調節(jié)，
使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。 可打開緩沖區(qū)Ⅰ，緩沖區(qū)Ⅱ和 PCR 擴增區(qū)的排風扇往外排氣，在實驗區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風量可調的回風口，空氣通過回風口向室內(nèi)換氣。
三、消毒
在三個實驗區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用。 在試劑準備區(qū)和標本制備區(qū) 還設置移動紫外線燈，對實驗桌進行局部消毒。
四、機械連鎖不銹鋼傳遞窗 試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼(不建議使用電子連鎖方式)傳遞窗傳遞，保證試劑和標本在傳遞過程中不受污染(人物分流)。
五、地面 地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進行清掃，耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚(至少800mm×800mm)接縫需要小于2mm。
六、照明 燈具要選用凈化燈具，能達到便于清洗、不積塵的特點。 在建設的過程中應注意：
(1)規(guī)范的安裝流程和全面的服務流程。 (2)嚴格按照規(guī)范科學設計的安裝流程。 (3)安裝前需要確定以下安裝條件，
如：電源電壓，電源進線位置，電話網(wǎng)絡線進線位置，進水水壓，最小安裝空間，地面平整度，通風孔、進水管和下水管的位置等，理想狀態(tài)的空間尺寸和通風口尺寸。
PCR實驗常見問題
【實驗】PCR常見問題總結
PCR產(chǎn)物的電泳檢測時間一般為48h以內(nèi)，有些最好于當日電泳檢測，大于48h后帶型不規(guī)則甚致消失。 一.假陰性，不出現(xiàn)擴增條帶
PCR反應的關鍵環(huán)節(jié)有①模板核酸的制備，②引物的質量與特異性，③酶的質量及活性 ④PCR循環(huán)條件。尋找原因亦應針對上述環(huán)節(jié)進行分析研究。
模板：①模板中含有雜蛋白質，②模板中含有Taq酶抑制劑，③模板中蛋白質沒有消化除凈，特別是染色體中的組蛋白，④在提取制備模板時丟失過多，或吸入酚。⑤模板核酸變性不徹底。在酶和引物質量好時，不出現(xiàn)擴增帶，極有可能是標本的消化處理，模板核酸提取過程出了毛病，因而要配制有效而穩(wěn)定的消化處理液，其程序亦應固定不宜隨意更改。
酶失活：需更換新酶，或新舊兩種酶同時使用，以分析是否因酶的活性喪失或不夠而導致假陰性。需注意的是有時忘加Taq酶或溴乙錠。
引物：引物質量、引物的濃度、兩條引物的濃度是否對稱，是PCR失敗或擴增條帶不理想、容易彌散的常見原因。有些批號的引物合成質量有問題，兩條引物一條濃度高，一條濃度低，造成低效率的不對稱擴增，對策為：①選定一個好的引物合成單位。②引物的濃度不僅要看OD值，更要注重引物原液做瓊脂糖凝膠電泳，一定要有引物條帶出現(xiàn)，而且兩引物帶的亮度應大體一致，如一條引物有條帶，一條引物無條帶，此時做PCR有可能失敗，應和引物合成單位協(xié)商解決。如一條引物亮度高，一條亮度低，在稀釋引物時要平衡其濃度。③引物應高濃度小量分裝保存，防止多次凍融或長期放冰箱冷藏部分，導致引物變質降解失效。④引物設計不合理，如引物長度不 夠，引物之間形成二聚體等。
Mg2+濃度：Mg2+離子濃度對PCR擴增效率影響很大，濃度過高可降低PCR擴增的特異性，濃度過低則影響PCR擴增產(chǎn)量甚至使PCR擴增失敗而不出擴增條帶。
反應體積的改變：通常進行PCR擴增采用的體積為20ul、30ul、50ul。或100ul，應用多大體積進行PCR擴增，是根據(jù)科研和臨床檢測不同目的而設定，在做小體積如20ul后，再做大體積時，一定要模索條件，否則容易失敗。
物理原因：變性對PCR擴增來說相當重要，如變性溫度低，變性時間短，極有可能出現(xiàn)假陰性;退火溫度過低，可致非特異性擴增而降低特異性擴增效率退火溫度過高影響引物與模板的結合而降低PCR擴增效率。有時還有必要用標準的溫度計，檢測一下擴增儀或水溶鍋內(nèi)的變性、退火和延伸溫度，這也是PCR失敗的原因之一。
靶序列變異：如靶序列發(fā)生突變或缺失，影響引物與模板特異性結合，或因靶序列某段缺失使引物與模板失去互補序列，其PCR擴增是不會成功的。 1假陽性
出現(xiàn)的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。
引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行PCR擴增時，擴增出的PCR產(chǎn)物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出現(xiàn)假陽性。需重新設計引物。
靶序列或擴增產(chǎn)物的交叉污染：這種污染有兩種原因：一是整個基因組或大片段的交叉污染，導致假陽性。這種假陽性可用以下方法解決：①操作時應小心輕柔，防止將靶序列吸入加樣槍內(nèi)或濺出離心管外。②除酶及不能耐高溫的物質外，所有試劑或 器材均應高壓消毒。所用離心管及樣進槍頭等均應一次性使用。③必要時，在加標本前，反應管和試劑用紫外線照射，以破壞存在的核酸。二是空氣中的小片段核酸污染，這些小片段比靶序列短，但有一定的同源性?？苫ハ嗥唇樱c引物互補后，可擴增出PCR產(chǎn)物，而導致假陽性的產(chǎn)生，可用巢式PCR方法來減輕或消除。 2出現(xiàn)非特異性擴增帶
PCR擴增后出現(xiàn)的條帶與預計的大小不一致，或大或小，或者同時出現(xiàn)特異性擴增帶與非特異性擴增帶。非特異性條帶的出現(xiàn)，其原因：一是引物與靶序列不完全互補、或引物聚合形成二聚體。二是Mg2+離子濃度過高、退火溫度過低，及PCR循環(huán)次數(shù)過多有關。其次是酶的質和量，往往一些來源的酶易出現(xiàn)非特異條帶而另一來源的酶則不出現(xiàn)，酶量過多有時也會出現(xiàn)非特異性擴增。其對策有：①必要時重新設計引物。②減低酶量或調換另一來源的酶。③降低引物量，適當增加模板量，減少循環(huán)次數(shù)。④適當提高退火溫度或采用二溫度點法(93℃變性，65℃左右退火與延伸)。 3出現(xiàn)片狀拖帶或涂抹帶
PCR擴增有時出現(xiàn)涂抹帶或片狀帶或地毯樣帶。其原因往往由于酶量過多或酶的質量差，dNTP濃度過高，Mg2+濃度過高，退火溫度過低，循環(huán)次數(shù)過多引起。其對策有：①減少酶量，或調換另一來源的酶。②減少dNTP的濃度。③適當降低Mg2+濃度。④增加模板量，減少循環(huán)次數(shù)。 二.PCR污染與對策
PCR反應的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產(chǎn)生。 污染原因
(一)標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中，由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散，導致彼此間的污染。
(二)PCR試劑的污染:主要是由于在PCR試劑配制過程中，由于加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染. (三)PCR擴增產(chǎn)物污染:這是PCR反應中最主要最常見的污染問題，因為PCR產(chǎn)物拷貝量 大(一般為1013拷貝/ml)，遠遠高于PCR檢測數(shù)個拷貝的極限，所以極微量的PCR產(chǎn)物 污染，就可造成假陽就可形成假陽性。
還有一種容易忽視，最可能造成PCR產(chǎn)物污染的形式是氣溶膠污染;在空氣與液體面摩擦時就可形成氣溶膠，在操作時比較劇烈地搖動反應管，開蓋時、吸樣時及污染進樣槍的反復吸樣都可形成氣溶膠而污染.據(jù)計算一個氣溶膠顆?？珊?8000拷貝，因而由 其造成的污染是一個值得特別重視的問題. (四)實驗室中克隆質粒的污染:在分子生物學實驗室及某些用克隆質粒做陽性對照的檢驗室，這個問題也比較常見。因為克隆質粒在單位容積內(nèi)含量相當高，另外在純化過程中需用較多的用具及試劑，而且在活細胞內(nèi)的質粒，由于活細胞的生長繁殖的簡便性及具有很強的生命力，其污染可能性也很大。污染的監(jiān)測
一個好的實驗室，要時刻注意污染的監(jiān)測，考慮有無污染是什么原因造成的污染，以便采取措施，防止和消除污染。 對照試驗
1.陽性對照:在建立PCR反應實驗室及一般的檢驗單位都應設有PCR陽性對照，它是PCR反應是否成功、產(chǎn)物條帶位置及大小是否合乎理論要求的一個重要的參考標志。陽性對照要選擇擴增度中等、重復性好，經(jīng)各種鑒定是該產(chǎn)物的標本，如以重組質粒為陽性對照，其含量宜低不宜高(100個拷貝以下)，但陽性對照尤其是重組質粒及高濃度陽性標本，其對檢測或擴增樣品污染的可能性很大。因而當某一PCR試劑經(jīng)自己使用穩(wěn)定，檢驗人員心中有數(shù)時，在以后的實驗中可免設陽性對照。
2.陰性對照:每次PCR實驗務必做陰性對照。它包括①標本對照:被檢的標本是血清就用鑒定后的正常血清作對照;被檢的標本是組織細胞就用相應的組織細胞作對照。②試劑對照:在PCR試劑中不加模板DNA或RNA，進行PCR擴增，以監(jiān)測試劑是否污染。
3.重復性試驗
4.選擇不同區(qū)域的引物進行PCR擴增 防止污染的方法
(一)合理分隔實驗室:將樣品的處理、配制PCR反應液、PCR循環(huán)擴增及PCR產(chǎn)物的鑒定等步驟分區(qū)或分室進行，特別注意樣本處理及PCR產(chǎn)物的鑒定應與其它步驟嚴格分開。最好能劃分①標本處理區(qū);②PCR反應液制備區(qū);③PCR循環(huán)擴增區(qū);④PCR產(chǎn)物鑒定區(qū)。其實驗用品及吸樣槍應專用，實驗前應將實驗室用紫外線消毒以破壞殘留的DNA或RNA。
(二)吸樣槍:吸樣槍污染是一個值得注意的問題。由于操作時不慎將樣品或模板核酸吸入槍內(nèi)或粘上槍頭是一個嚴重的污染源，因而加樣或吸取模板核酸時要十分小心，吸樣要慢，吸樣時盡量一次性完成，忌多次抽吸，以免交叉污染或產(chǎn)生氣溶膠污染。
(三)預混和分裝PCR試劑:所有的PCR試劑都應小量分裝，如有可能，PCR反應液應預先配制好，然后小量分裝，-20℃保存。以減少重復加樣次數(shù)，避免污染機會。另外，PCR試劑，PCR反應液應與樣品及PCR產(chǎn)物分開保存，不應放于同一冰盒或同一冰箱。
(四)防止操作人員污染，使用一次性手套、吸頭、小離心管應一次性使用。 (五)設立適當?shù)年栃詫φ蘸完幮詫φ眨栃詫φ找阅艹霈F(xiàn)擴增條帶的最低量的標準病原體核酸為宜，并注意交叉污染的可能性，每次反應都應有一管不加模板的試劑對照及相應不含有被擴增核酸的樣品作陰性對照。
(六)減少PCR循環(huán)次數(shù)，只要PCR產(chǎn)物達到檢測水平就適可而止。
(七)選擇質量好的Eppendorf管，以避免樣本外溢及外來核酸的進入，打開離心管前應先離心，將管壁及管蓋上的液體甩至管底部。開管動作要輕，以防管內(nèi)液體濺出。
PCR實驗室裝飾要求
一、實驗室彩鋼板壁板技術要求
1、工程材料概況
本次工程墻面采用的彩鋼板為立板鐵皮板厚度0.5mm巖棉50mm手工夾芯巖棉彩鋼板密度120kg/m³凈化復合板，頂板鐵皮版厚度0.5mm;玻鎂+巖棉 50MM厚手工夾芯巖棉彩鋼板 密度120kg/m³用于實驗生產(chǎn)區(qū)域(耐火極限達2小時);用于實驗區(qū)域A級防火板。
彩鋼板壁板墻面表面光滑平整、無凹凸部分及劃痕，且不產(chǎn)塵、不積灰、耐腐蝕、防潮防霉、容易清潔。潔凈室的吊頂與壁板，壁板與壁板，壁板與地面鏈接無死角(陰角不能呈90度直角)，內(nèi)壁板轉角應為不小于50mm內(nèi)、外圓弧鋁合金型材(與壁板同色)，壁板陽角處應為不小于50mm外圓弧鋁合金型材(與墻板同色)。
1.1實驗室彩鋼板壁板
手工彩鋼板壁板的尺寸：彩鋼板壁板的基本寬度為：1180mm，厚度為：50mm。壁板與壁板之間用中置鋁料連接，壁板之間的理論縫隙間距為3mm，縫隙用道康寧等國內(nèi)外知名品牌中性硅膠密封。壁板的雙面彩鋼板(面漆為烤漆)寶鋼板或高于此品牌等，厚度大于等于0.5mm(不銹鋼面板厚度與之相同,材質2B-304)，壁板內(nèi)夾鋁蜂窩。
1)質量標準
安裝竣工的彩鋼板壁板系統(tǒng)符合以下標準：
本次工程的潔凈室系統(tǒng)符合中國制藥企業(yè)GMP及歐盟藥品GMP認證要求。 2)板材
本次工程壁板的雙面彩鋼板顏色為灰白色(不銹鋼面板除外)，出廠前在其表面覆以塑料薄膜以防止運輸及安裝過程中損壞及劃傷。
3)表面平整度
彩鋼板壁板表面平整光滑、無凹凸部分及劃痕。板面平整度為(2米)：<1.0mm，板四個邊的直線度為(2米)：<1.5mm。
4)測量偏差標準(測量偏差標準如下)： 高度不超過 1.5mm/塊; 寬度不超過 0.5mm/塊; 厚度不超過 1.0mm/塊。 5)隔音
房內(nèi)測得的隔音值為： 完整的墻大于48dB; 帶窗的墻大于40dB; 門大于32dB。 6)保溫
不保溫墻體的傳熱系數(shù)為：4W/ m2K; 7)防火性能
彩鋼板夾芯板內(nèi)襯鋁蜂窩和玻鎂板墻體的耐火極限為不小于1小時。要求提供檢測報告。
1.2可上人吊頂
本次工程吊頂為可上人吊頂。頂板的上下表面均為彩鋼板，兩塊彩鋼板板之間鋁蜂窩和單層玻鎂板。
1)頂板
吊頂板上、下表面均為0.5mm厚武鋼產(chǎn)或寶鋼產(chǎn)彩鋼板，顏色為灰白色。頂板生產(chǎn)出廠時，其表面覆蓋有塑料薄膜以防止頂板在運輸及安裝過程中造成損壞。
2)質量標準
安裝竣工的彩鋼板頂板系統(tǒng)符合以下標準： 潔凈施工及驗收規(guī)范
本次工程的潔凈室系統(tǒng)符合中國制藥企業(yè)GMP及歐盟藥品GMP認證要求。 3)隔音
房內(nèi)測得的隔音值為： 完整的頂板大于35dB; 開過洞的頂板大于28dB。 4)抗壓性能
可上人頂板可承受超過100kg/m2的負載， 壓差小于100帕時，無需特別處理。 由于頂板可承受超過100 kg/m2的負載，因此在頂板的吊桿選擇上采用10mm的全螺紋鍍鋅絲桿。絲桿的承重超過300kg。同時在全螺紋鍍鋅絲桿安裝后必須進行承重試驗抽檢，確保安裝后的吊桿具有完全的承載能力。 5)保溫
頂板的導熱系數(shù)為0.0952W/mK。 6)防火性能
頂板的耐火極限為不小于1小時，要求提供檢測報告。 7)密封性能
實驗室工程不同于普通廠房之處在于醫(yī)藥潔凈廠房工程的圍護結構在工況切換的進行情況下必須考慮具備良好的嚴密性能，特別保證建筑結構抗震的前提下還具備震后依然密封的性能，
天花龍骨。根據(jù)本次工程的特點，制藥潔凈廠房對細菌量和潔凈度的控制要求高。因此，選用的天花板龍骨既要滿足強度要求，又要能滿足吊頂系統(tǒng)的密封要求。
為了確保房間的密封度和防止吊頂外部空間等進入實驗室內(nèi)，在吊頂上部的龍骨兩側再用鍍鋅鋼板加以密封。
8)吊桿密度不低于1米間距，與頂部連接牢固，與板面連接處平整牢固。 1.3潔凈密閉觀察窗
潔凈密閉觀察窗的基本參數(shù)要求為：雙層玻璃窗，玻璃為8mm厚的鋼化玻璃，窗的尺寸：根據(jù)實際情況定制，主要是與壁板的規(guī)格相配套。尺寸詳見施工圖紙及施工說明。
窗框
窗框選用鋁合金框體噴塑，顏色與壁板相同。窗和墻面成為一個平面。 玻璃
為8mm厚的鋼化玻璃。玻璃的防火性能大于90分鐘。要求提供檢測報告。 玻璃的安全性
玻璃彼此是獨立的，若有一塊損壞實驗室的生產(chǎn)不會因此受到干擾。 測量偏差標準 高度約 1.0mm; 寬度約 1.0mm; 厚度約 0.5mm。 1.4潔凈密閉門
本次工程的潔凈密閉門為鋼制潔凈密閉門，帶自動下門封，門上設觀察雙層玻璃窗，窗玻璃采用5mm厚鋼化玻璃，雙層玻璃中間有吸濕劑。
潔凈密閉門、安全門的尺寸：按圖紙要求，根據(jù)業(yè)主的要求進行加工生產(chǎn)。 1.5實驗室C棟1層高度要求達到2.8米，實驗室C棟二層高度要求達到2.6米，實驗室C棟3層高度要求達到2.6米。
PCR實驗室基本要求
PCR實驗室規(guī)化設計
1、 主體結構：
主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結構牢固，線條簡明，美觀大方，密封性好。
2、 標準的三區(qū)分隔和氣壓調節(jié)：
將PCR過程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增檢測三個獨立的實驗區(qū)。整個區(qū)域有一個整體緩沖走廊。每個獨立實驗區(qū)設置有緩沖區(qū)，同時各區(qū)通過氣壓調節(jié)，使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。 可打開緩沖區(qū)Ⅰ，緩沖區(qū)Ⅱ和 PCR 擴增區(qū)的排風扇往外排氣，在實驗區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風量可調的回風口，空氣通過回風口向室內(nèi)換氣。
3、 消毒：
在三個實驗區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用。 在試劑準備區(qū)和標本制備區(qū) 還設置移動紫外線燈，對實驗桌進行局部消毒。
4、 機械連鎖不銹鋼傳遞窗：
試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼(不建議使用電子連鎖方式)傳遞窗傳遞，保證試劑和標本在傳遞過程中不受污染(人物分流)。
5、 地面
地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進行清掃，耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚(至少800mm×800mm)接縫需要小于2mm。
6、 照明
燈具要選用凈化燈具，能達到便于清洗、不積塵的特點。 標準的PCR實驗室在建設的過程中應注意： ●規(guī)范的安裝流程和全面的服務流程。 ●嚴格按照規(guī)范科學設計的安裝流程。
●安裝前需要確定以下安裝條件，如：電源電壓，電源進線位置，電話網(wǎng)絡線進線位置，進水水壓，最小安裝空間，地面平整度，通風孔、進水管和下水管的位置等，理想狀態(tài)的空間尺寸和通風口尺寸。 PCR 實驗室基本要求
2.1 PCR 實驗室依據(jù)所使用的方法可分為試劑準備、標本制備、擴增、產(chǎn)物分析等三或四個區(qū)域。只是使用實時熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實驗室，有上述前面三個區(qū)域即可。各區(qū)域應完全獨立分隔，不應有任何的空氣直通。
2.2標準的PCR實驗室產(chǎn)物分析區(qū)或三個區(qū)域的最后一個區(qū)域(即擴增及產(chǎn)物分析區(qū))，空氣流向應由室外向室內(nèi)，可通過在室內(nèi)設置通風櫥、排風扇或其他排風系統(tǒng)達到空氣流由室外向室內(nèi)流動的要求。
2.3 PCR實驗室各區(qū)域儀器設備配備通常如下： 2.3.1標準的PCR實驗室 試劑準備區(qū): 儀器設備主要應有加樣器、冰箱、天平、低速離心機、混勻器、可移動紫外燈等。可使用超凈工作臺作為試劑配制操作臺面。 2.3.2 標準的PCR實驗室 標本制備區(qū)
儀器設備主要應有生物安全柜(最好為B2, 可避免提取核酸在柜內(nèi)反復循環(huán)，造成標本間交叉“污染”，出現(xiàn)假陽性結果。此外還應配備加樣器、臺式高速離心機(冷凍及常溫)、臺式低速離心機、恒溫設備(水浴和/或干浴儀)、冰箱、混勻器和可移動紫外燈等。
2.3.3 標準的PCR實驗室 擴增區(qū) 主要儀器就是核酸擴增熱循環(huán)儀(PCR儀，實時熒光或普通的)。熱循環(huán)儀的電源應專用，并配備一個穩(wěn)壓電源或UPS，以防止由于電壓的波動對擴增測定的影響。此外，根據(jù)工作需要，還可配備加樣器、超凈臺等。 2.3.4 標準的PCR實驗室 產(chǎn)物分析區(qū)：
本區(qū)所使用的儀器設備可能有加樣器、電泳儀(槽)、電轉印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測序儀、酶標儀和洗板機等。
在理想情況下，PCR實驗室試劑準備、標本制備、擴增三個區(qū)域可設置緩沖間。在緩沖間內(nèi)，可設置正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)。 PCR實驗室平面布置示意圖
一般實驗室間隔材料分:彩鋼板,不銹鋼板,理化板等,價格依次而上, 主要考慮不產(chǎn)塵,不滋菌,容易清理就行
一般實驗室間隔材料分:彩鋼板,不銹鋼板,理化板等,價格依次而上, 主要考慮不產(chǎn)塵,不滋菌,容易清理就行
**衛(wèi)生部PCR研究員李金明(衛(wèi)生部臨床檢驗中心臨床免疫室主任,研究員)的PCR建設方案再說吧!國外的資料不一定是最好。個人覺得李金明的實驗室區(qū)正壓(擴增分析區(qū)因為沒有緩沖，所以為負壓)，緩沖間負壓的作法可以更好的防止氣體的外泄及防止試劑準備區(qū)、標本制備區(qū)、產(chǎn)物擴增區(qū)、擴增分析區(qū)四區(qū)之間的氣體相互滲漏。PCR實驗室也可以分為三個區(qū)，即第
三、四區(qū)合為一區(qū)，必須設立緩沖間。有條件建設實驗室采用三十萬級的標準來建設?？照{系統(tǒng)采用制冷劑各區(qū)獨立循環(huán)，可以防止氣流交叉。 **疾病預防控制中心實驗室建設之PCR 實驗室基本要求: PCR實驗室可以是分散形式，也可以是組合形式。完成一組PCR實驗，通常應經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個實驗過程，若實驗工藝需要，還應增加樣品粉碎過程。
PCR實驗室裝修設計方案
標準的PCR實驗室裝修設計主要包括以下幾個方面：
1、 實驗室主體結構：
實驗室設計主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結構牢固，線條簡明，美觀大方密封性好。
2、標準的三區(qū)分隔和氣壓調節(jié)：
將PCR過程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增檢測三個獨立的實驗區(qū)。整個區(qū)域有一個整體緩沖走廊。每個獨立實驗區(qū)設置有緩沖區(qū)， 同時各區(qū)通過氣壓調節(jié)，使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
可打開緩沖區(qū)Ⅰ，緩沖區(qū)Ⅱ和 PCR 擴增區(qū)的排風扇往外排氣，在實驗區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風量可調的回風口，空氣通過回風口向室內(nèi)換氣。
3、消毒：
在三個實驗區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用。 在試劑準備區(qū)和標本制備區(qū) 還設置移動紫外線燈，對實驗桌進行局部消毒。
4、機械連鎖不銹鋼傳遞窗：
試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼(不建議使用電子連鎖方式)傳遞窗傳遞，保證試劑和標本在傳遞過程中不受污染(人物分流)。
5、地面：
地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進行清掃，耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚(至少800mm×800mm)接縫需要小于2mm。
6、照明：
燈具要選用凈化燈具，能達到便于清洗、不積塵的特點。 在建設的過程中應注意：
●規(guī)范的安裝流程和全面的服務流程。
●嚴格按照規(guī)范科學設計的安裝流程。
●安裝前需要確定以下安裝條件，如：電源電壓，電源進線位置，電話網(wǎng)絡線進線位置，進水水壓，最小安裝空間，地面平整度，通風孔、進水管和下水管的位置等，理想狀態(tài)的空間尺寸和通風口尺寸。
