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微生物實(shí)驗(yàn)室建設(shè)方案
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微生物實(shí)驗(yàn)室建設(shè)方案
微生物實(shí)驗(yàn)室概況
食品微生物實(shí)驗(yàn)室主要負(fù)責(zé)各類微生物項(xiàng)目的檢測(cè),主要檢測(cè)項(xiàng)目有菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌、酵母、乳酸菌、雙歧桿菌、罐頭商業(yè)無菌、致病菌(如沙門氏菌、志賀氏菌、溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌等)。
微生物實(shí)驗(yàn)室由準(zhǔn)備室、洗滌室、滅菌室、無菌室、恒溫培養(yǎng)室和普通實(shí)驗(yàn)室六部分組成。這些房間的共同特點(diǎn)是地板和墻壁的質(zhì)地光滑堅(jiān)硬,儀器和設(shè)備的陳設(shè)簡(jiǎn)潔,便于打掃衛(wèi)生。
微生物實(shí)驗(yàn)室功能分區(qū)
(一)準(zhǔn)備室
準(zhǔn)備室用于配制培養(yǎng)基和樣品處理等。室內(nèi)設(shè)有試劑柜、存放器具或材料的專柜、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、電爐、冰箱和上下水道、電源等。
(二)洗滌室
洗滌室用于洗刷器皿等。由于使用過的器皿已被微生物污染,有時(shí)還會(huì)存在病原微生物。因此,在條件允許的情況下,最好設(shè)置洗滌室。室內(nèi)應(yīng)備有加熱器、蒸鍋,洗刷器皿用的盆、桶等,還應(yīng)有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。
(三)滅菌室
滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種器具的滅菌,室內(nèi)應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設(shè)備及設(shè)施。
(四)無菌室
無菌室一般為4 - 5 ㎡、高 2.5 米的獨(dú)立小房間(與外間隔離),專辟于微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。
無菌室也稱接種室,是系統(tǒng)接種、純化菌種等無菌操作的專用實(shí)驗(yàn)室。在微生物工作中,菌種的接種移植是一項(xiàng)主要操作,這項(xiàng)操作的特點(diǎn)就是要保證菌種純種,防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌,很易造成污染,對(duì)接種工作干擾很大。
1.無菌室的設(shè)置
無菌室應(yīng)根據(jù)既經(jīng)濟(jì)又科學(xué)的原則來設(shè)置。其基本要求有以下幾點(diǎn):
(1)無菌室應(yīng)有內(nèi)、外兩間,內(nèi)間是無菌室,外間是緩沖室。房間容積不宜過大,以便于空氣滅菌。最小內(nèi)間面積2×2.5=5m2,外間面積1×2=2m2,高以2.5m以下為宜,都應(yīng)有天花板。
(2)內(nèi)間應(yīng)當(dāng)設(shè)拉門,以減少空氣的波動(dòng),門應(yīng)設(shè)在離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置上;外間的門最好也用拉門,要設(shè)在距內(nèi)間最遠(yuǎn)的位置上。
(3)在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔扇”上,應(yīng)開一個(gè)小窗,作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道,以減少人員進(jìn)出內(nèi)間的次數(shù),降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm,內(nèi)外都掛對(duì)拉的窗扇。
(4)無菌室容積小而嚴(yán)密,使用一段時(shí)間后,室內(nèi)溫度很高,故應(yīng)設(shè)置通氣窗。通氣窗應(yīng)設(shè)在內(nèi)室進(jìn)門處的頂棚上(即離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置),最好為雙層結(jié)構(gòu),外層為百葉窗,內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開啟,以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機(jī)。
2.無菌室內(nèi)設(shè)備和用具
(1)無菌室內(nèi)的工作臺(tái),不論是什么材質(zhì)、用途的,都要求表面光滑和臺(tái)面水平。
(2)在內(nèi)室和外室各安裝一個(gè)紫外燈(多為30W)。內(nèi)室的紫外線燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方,離地面2m,外室的紫外線燈可安裝在外室中央。
(3)外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。
(4)內(nèi)室應(yīng)有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、廢物筐等。
3.無菌室的滅菌消毒
(1)薰蒸:這是無菌室徹底滅菌的措施。無菌室使用了較長(zhǎng)時(shí)間,污染比較嚴(yán)重時(shí),應(yīng)進(jìn)行薰蒸滅菌??捎眉兹⑷樗峄蛄蚧寝拐?。
(2)噴霧:在每次使用無菌室前進(jìn)行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微塵飛場(chǎng),并有殺菌作用??捎?%石炭酸噴霧。
(3)紫外線照射:在每次使用無菌室前進(jìn)行。紫外線有較好的殺菌效果。通常應(yīng)開啟紫外線燈照射30~60min。
4.無菌室工作規(guī)程
(1)無菌室滅菌。每次使用前開啟紫外線燈照射30min以上,或在使用前30min,對(duì)內(nèi)外室用5%石炭酸噴霧。
(2)用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室;在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋,戴好口罩,然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘。
(3)將各種需用物品搬進(jìn)內(nèi)室清點(diǎn)、就位,用5%石炭酸在工作臺(tái)面上方和操作員站位空間噴霧,返回外室,5~10min后再進(jìn)內(nèi)室工作。
(4)接種操作前,用70%酒精棉球擦手;進(jìn)行無菌操作時(shí),動(dòng)作要輕緩,盡量減少空氣波動(dòng)和地面揚(yáng)塵。
(5)工作中應(yīng)注意安全。如遇棉塞著火,用手緊握或用濕布包裹熄滅,切勿用嘴吹,以免擴(kuò)大燃燒;如遇有菌培養(yǎng)物灑落或打碎有菌容器時(shí),應(yīng)用浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布包裹后,并用浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布擦拭臺(tái)面或地面,用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作。
(6)工作結(jié)束,立即將臺(tái)面收拾干凈,將不應(yīng)在無菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無菌室后,對(duì)無菌室用5%石炭酸噴霧,或開紫外線燈照射30min。
(五)恒溫培養(yǎng)室
1.培養(yǎng)室的設(shè)置
(1)培養(yǎng)室應(yīng)有內(nèi)、外兩間,內(nèi)室是培養(yǎng)室,外室是緩沖室。房間容積不宜大,以利于空氣滅菌,內(nèi)室面積在3.2×4.4=14㎡左右,外室面積在3.2×1.8=6㎡左右,高以2.5m左右為宜,都應(yīng)有天花板。
(2)分隔內(nèi)室與外室的墻壁上部應(yīng)設(shè)帶空氣過濾裝置的通風(fēng)口。
(3)為滿足微生物對(duì)溫度的需要,需安裝恒溫恒濕機(jī)。
(4)內(nèi)外室都應(yīng)在室中央安裝紫外線燈,以供滅菌用。
2.培養(yǎng)室內(nèi)設(shè)備及用具
(1)內(nèi)室通常配備培養(yǎng)架和搖瓶機(jī)(搖床)。常用的搖瓶機(jī)有旋轉(zhuǎn)式、往復(fù)式兩種。
(2)外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等。
3.培養(yǎng)室的滅菌、消毒
同無菌室的滅菌、消毒措施。
小規(guī)模的培養(yǎng)可不啟用恒溫培養(yǎng)室,而在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。
(六)普通實(shí)驗(yàn)室
進(jìn)行微生物的觀察、計(jì)數(shù)和生理生化測(cè)定工作的場(chǎng)所。室內(nèi)的陳設(shè)因工作側(cè)重點(diǎn)不同而有很大的差異。一般均配備實(shí)驗(yàn)臺(tái)、顯微鏡、柜子及凳子。實(shí)驗(yàn)臺(tái)要求平整、光滑,實(shí)驗(yàn)柜要足以容納日常使用的用具及藥品等。
(七)更衣室
是進(jìn)入無菌室之前工作人員進(jìn)行更衣、洗手的地方。室內(nèi)設(shè)置無菌室及緩沖室的電源控制開關(guān)和放置無菌操作時(shí)穿的工作服、鞋、帽子、口罩等。
(八)辦公室
登記待檢驗(yàn)樣品;出檢測(cè)報(bào)告;處理有關(guān)文件資料;放松休息等。
微生物實(shí)驗(yàn)室的常用儀器及功能
微生物實(shí)驗(yàn)室的通風(fēng)系統(tǒng)
1.必須安裝獨(dú)立的通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)以控制實(shí)驗(yàn)室氣流方向和壓強(qiáng)梯度。該系統(tǒng)必須確保實(shí)驗(yàn)室使用時(shí),室內(nèi)空氣除通過排風(fēng)管道經(jīng)高效過濾排出外,不得從實(shí)驗(yàn)室的其他部位或縫隙排向室外;同時(shí)確保實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的氣流由“清潔”區(qū)域流向“污染”區(qū)域。進(jìn)風(fēng)口和排風(fēng)口的布局應(yīng)使實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)的死空間降低到最小程度。
2.通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)為直排系統(tǒng),不得采用部分回風(fēng)系統(tǒng)。
3.環(huán)境參數(shù):相對(duì)于實(shí)驗(yàn)室外部,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部保持負(fù)壓。實(shí)驗(yàn)間的相對(duì)壓強(qiáng)以-30Pa~-40Pa為宜,緩沖間的相對(duì)壓強(qiáng)以-15Pa~-20Pa為宜。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的溫、濕度以控制在人體舒適范圍為宜,或根據(jù)工藝要求而定。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的空氣潔凈度以GB 50073—2013《潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》中所定義的七級(jí)至八級(jí)為宜。實(shí)驗(yàn)室人工照明應(yīng)均勻,不眩目,照度不低于500lx。
4.為確保實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的氣流由“清潔”區(qū)域流向“污染”區(qū)域,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不應(yīng)使用雙側(cè)均勻分布的排風(fēng)口布局。不應(yīng)采用上送上排的通風(fēng)設(shè)計(jì)。由生物安全柜排出的經(jīng)內(nèi)部高效過濾的空氣可通過系統(tǒng)的排風(fēng)管直接排至大氣,也可送入建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)。應(yīng)確保生物安全柜與排風(fēng)系統(tǒng)的壓力平衡。
5.實(shí)驗(yàn)室的進(jìn)風(fēng)應(yīng)經(jīng)初、中、高效三級(jí)過濾。
6.實(shí)驗(yàn)室的排風(fēng)必須經(jīng)高效過濾或加其他方法處理后,以不低于12m/s的速度直接向空中排放。該排風(fēng)口應(yīng)遠(yuǎn)離系統(tǒng)進(jìn)風(fēng)口位置。處理后的排風(fēng)也可排入建筑物的排風(fēng)管道,但不得被送回到該建筑物的任何部位。
7.進(jìn)風(fēng)和排風(fēng)高效過濾器必須安裝在實(shí)驗(yàn)室設(shè)在圍護(hù)結(jié)構(gòu)上的風(fēng)口里,以避免污染風(fēng)管。
8.實(shí)驗(yàn)室的通風(fēng)系統(tǒng)中,在進(jìn)風(fēng)和排風(fēng)總管處應(yīng)安裝氣密型調(diào)節(jié)閥門,必要時(shí)可完全關(guān)閉以進(jìn)行室內(nèi)化學(xué)熏蒸消毒。
9.實(shí)驗(yàn)室的通風(fēng)系統(tǒng)中所使用的所有部件均必須為氣密型。所使用的高效過濾器不得為木框架。
10.應(yīng)安裝風(fēng)機(jī)啟動(dòng)自動(dòng)聯(lián)鎖裝置,確保實(shí)驗(yàn)室啟動(dòng)時(shí)先開排風(fēng)機(jī)后開送風(fēng)機(jī)。關(guān)閉時(shí)先關(guān)送風(fēng)機(jī)后關(guān)排風(fēng)機(jī)。
11.不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)安裝分體空調(diào)器。
其他注意事項(xiàng)
1.實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面應(yīng)不透水,耐腐蝕、耐熱。
2.實(shí)驗(yàn)室中的家具應(yīng)牢固。為易于清潔,各種家具和設(shè)備之間應(yīng)保持一定間隙。應(yīng)有專門放置生物廢棄物容器的臺(tái)(架)。家具和設(shè)備的邊角和突出部位應(yīng)光滑、無毛刺,以圓弧形為宜。
3.所需真空泵應(yīng)放在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。真空管線必須裝置在線高效過濾器。
4.壓縮空氣等鋼瓶應(yīng)放在實(shí)驗(yàn)室外。穿過圍護(hù)結(jié)構(gòu)的管道與圍護(hù)結(jié)構(gòu)之間必須用不收縮的密封材料加以密封。氣體管線必須裝置在線高效過濾器和防回流裝置。
5.實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)設(shè)置洗眼裝置。
6.實(shí)驗(yàn)室出口應(yīng)有發(fā)光指示標(biāo)志。
7.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外必須設(shè)置通訊系統(tǒng)。
8.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的實(shí)驗(yàn)記錄等資料應(yīng)通過傳真機(jī)發(fā)送至實(shí)驗(yàn)室外。