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細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)（細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)方案要點(diǎn)）
發(fā)布：admin 發(fā)布時(shí)間：2023-01-07 19:40:51 瀏覽：
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室主要是在合適的溫濕度、光照度、PH值、潔凈度的環(huán)境下研究培養(yǎng)出來的細(xì)菌。主要是運(yùn)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)要求：
一、基本要求
1、總建筑面積宜不小于1000m2。
2、潔凈區(qū)使用面積宜不小于500m2。
3、潔凈室的凈高度應(yīng)在2.5-2.8m之間。
二、總體布局
1、總體平面布局應(yīng)符合GB19489、GB50333、GB50346、GB50457的要求。
2、潔凈區(qū)各室布局應(yīng)清晰合理，不應(yīng)交叉混合使用，且應(yīng)符合人、物分流的原則。
3、人流通道、潔凈區(qū)入口應(yīng)設(shè)緩沖室。
4、廢物、污染物需設(shè)置專用傳遞窗。
5、傳遞窗送風(fēng)方式應(yīng)采用上送側(cè)回的方式。
6、通道門的開啟方向應(yīng)由低潔凈級(jí)向高潔凈級(jí)的方向開啟。
7、所有潔凈區(qū)不應(yīng)安裝水池和地漏。(除更衣室外)
三、環(huán)境要求
1、環(huán)境設(shè)計(jì)應(yīng)符合GB19489、GB50346、GB50457、《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》和AABB的要求。
2、潔凈區(qū)的環(huán)境技術(shù)指標(biāo)應(yīng)符合以下要求：
3、空氣潔凈度等級(jí)劃分應(yīng)符合表1要求;
4、二更、緩沖、細(xì)胞制備區(qū)、細(xì)胞培養(yǎng)區(qū)的空氣潔凈度應(yīng)符合表1中的C級(jí)。細(xì)胞制備操作相關(guān)區(qū)域的空氣潔凈度至少應(yīng)在C級(jí)背景下的A級(jí)環(huán)境中進(jìn)行;
5、溫度應(yīng)控制在22±4℃，濕度應(yīng)控制在45%～65%為宜;
6、潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間、不同空氣潔凈度的潔凈區(qū)之間的壓差應(yīng)>10Pa。潔凈區(qū)內(nèi)不同功能及級(jí)別房間之間宜保持適當(dāng)?shù)膲翰钐荻?，以防止污染和交叉污?
7、總送風(fēng)量中(非單向流)應(yīng)有10%～30%的新風(fēng)量;
8、噪聲級(jí)(空態(tài))應(yīng)≤65dB(A);
9、般照明的照度值宜>300LX，對(duì)照度有特殊要求的區(qū)域(細(xì)胞產(chǎn)品燈檢區(qū))應(yīng)設(shè)置局部照明。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)方案要點(diǎn)
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室由無菌操作區(qū)、孵育區(qū)、制備區(qū)、儲(chǔ)藏區(qū)、清洗和消毒滅菌區(qū)6部分組成，這些區(qū)域的共同特點(diǎn)是房間要寬敞、明亮，地面要便于清潔、防滑，墻壁的質(zhì)地光滑堅(jiān)硬，儀器設(shè)備布局合理，方便操作，避免交叉干擾，陳設(shè)簡(jiǎn)潔，便于清掃。
無菌操作區(qū)
無菌操作區(qū)是只限于細(xì)胞培養(yǎng)及其他無菌操作的區(qū)域，最好能與外界隔離，不能穿行或受其他干擾。在一般環(huán)境的空氣中，由于存在許多塵埃和雜菌，較易造成污染。
因此，接種工作要在空氣經(jīng)過滅菌的環(huán)境里進(jìn)行，小規(guī)模的無菌環(huán)境可利用超凈工作臺(tái)創(chuàng)造，大規(guī)模的需建無菌室。
理想的無菌操作室應(yīng)劃為三部分：
a) 更衣室―供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b) 緩沖間―位于更衣間與操作間之間，用于準(zhǔn)備工作，還有防止污染的作用，以保證操作間的無菌環(huán)境，同時(shí)可放置恒溫培養(yǎng)箱以及必需的小型儀器。
c) 無菌操作間―無菌操作間則專用于無菌操作、細(xì)胞培養(yǎng)，其大小要適當(dāng)，且其頂部不宜過高以保證紫外線的滅菌效果;墻壁光滑無死角以便清洗和消毒，無菌操作間容積小且為密閉式，一般無菌操作間的空氣消毒用紫外線燈，有的實(shí)驗(yàn)室使用無臭氧紫外線消毒器或電子消毒滅菌器。
凈化工作臺(tái)：操作簡(jiǎn)單，安裝方便，占用空間小且凈化效果很好。一般細(xì)菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺(tái)主要有兩種：a)側(cè)流式或稱垂直式 b)外流式或稱水平層流式。
孵育區(qū)
孵育區(qū)也稱培養(yǎng)區(qū)，本區(qū)對(duì)無菌的要求雖不比無菌區(qū)嚴(yán)格，但仍需清潔無塵，因此也應(yīng)設(shè)置在干擾少而非來往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進(jìn)行，后者費(fèi)用高，一般實(shí)驗(yàn)室多采用孵箱進(jìn)行工作。
制備區(qū)
制備區(qū)主要進(jìn)行培養(yǎng)液及有關(guān)培養(yǎng)用的液體等的制備。應(yīng)設(shè)有試劑柜、器械柜、實(shí)驗(yàn)臺(tái)和上水道、電源等，配備的主要儀器設(shè)備有水純化裝置、天平、微波爐、pH計(jì)、抽氣泵、電爐、培養(yǎng)分裝器、各種規(guī)格的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、移液管、燒杯、量筒、容量瓶等。
在有天平、pH計(jì)、磁力拌器等設(shè)備下完成制備以后，應(yīng)在無菌操作臺(tái)進(jìn)行過濾除菌。液體制備直接關(guān)系組織細(xì)胞養(yǎng)的成敗，因此必須嚴(yán)格無菌操作。
儲(chǔ)藏區(qū)
儲(chǔ)藏區(qū)主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等，此環(huán)境也需要清潔無塵。為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃。
細(xì)胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般為4 ℃下存放30min。轉(zhuǎn)放-20 ℃ 1 h，再轉(zhuǎn)入-80—-70℃過夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃)。因此儲(chǔ)存區(qū)必須配備冰箱、低溫冰箱、超低溫冰箱和液氮罐等設(shè)備。
清洗和消毒滅菌區(qū)
清潔和消毒滅菌區(qū)應(yīng)與其他區(qū)域分開，主要進(jìn)行所有細(xì)胞培養(yǎng)器皿的清洗、準(zhǔn)備、消毒及三蒸水制備等工作，應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌鍋、細(xì)菌過濾設(shè)備、電熱干燥箱、消毒柜、排風(fēng)設(shè)備等。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)要求
1、環(huán)境要求
溫度：儀器還是操作對(duì)溫度沒有特殊要求，維持舒適的溫度即可，比如18~26度。
濕度：過高的濕度會(huì)導(dǎo)致微生物的滋生，所以建議正常維持濕度在70%以下。
潔凈度：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)對(duì)潔凈區(qū)并沒有要求，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)里面只有細(xì)胞操作的時(shí)候要求無菌的環(huán)境，這時(shí)要求有局部的百級(jí)，通?？梢岳贸瑑襞_(tái)或者生物安全柜來實(shí)現(xiàn)，不過有時(shí)候?yàn)榱擞袀€(gè)更好一點(diǎn)的環(huán)境，減小超凈臺(tái)過濾器更換的時(shí)間，會(huì)維持室內(nèi)的潔凈度，比如萬級(jí)的潔凈度。
無菌無毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細(xì)胞在體外培養(yǎng)成功的首要條件。細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無菌環(huán)境要求很高，在細(xì)胞操作時(shí)，一般需要在100級(jí)空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行。
在體外培養(yǎng)的細(xì)胞由于缺乏對(duì)微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒物質(zhì)污染，或者自身代謝物質(zhì)積累，可導(dǎo)致細(xì)胞中毒死亡。
照明：滿足實(shí)驗(yàn)用的操作照度，通常在300LUX。
2、圍護(hù)結(jié)構(gòu)要求
雖然實(shí)驗(yàn)的操作對(duì)大環(huán)境沒有特殊要求，不過最好能有不產(chǎn)塵、不積塵的環(huán)境，能保證室內(nèi)的清潔，并且易于清洗、不容易滋生微生物，所以在選擇維護(hù)結(jié)構(gòu)時(shí)，選用彩鋼板、醫(yī)療板等潔凈板材是比較好的選擇，為了保證室內(nèi)的通透性，可以布置密閉窗。
3、消毒
通常做完實(shí)驗(yàn)后，都需要做終末消毒，室內(nèi)需要安裝紫外燈，利用紫外燈對(duì)空氣和表面消毒。
