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動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的無(wú)菌技術(shù)（動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本操作）
發(fā)布：admin 發(fā)布時(shí)間：2021-12-20 19:07:57 瀏覽：
1.蟾蜍 用左手將動(dòng)物握緊在手掌中，拇指和食指分別壓住其左、右前肢，并以左手中指、無(wú)名指、小指壓住其左腹和后肢，右手進(jìn)行腦、脊髓破壞等操作。抓取時(shí)，禁止擠壓兩側(cè)耳部的腺體，以免毒液射入眼中。
2.小鼠 小鼠溫順，一般不會(huì)咬人，抓取時(shí)先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠籠或?qū)嶒?yàn)臺(tái)向后拉，在其向前爬行時(shí)，用左手拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頸部皮膚，將鼠體置于左手掌中，把后肢拉直，以無(wú)名指按住鼠尾，小指按住后腿即可。這種在手中固定方法，能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的灌胃，皮下、肌肉和腹腔注射。如進(jìn)行解剖、手術(shù)、心臟采血和尾靜脈注射時(shí)，則要將小鼠取背臥位(必要時(shí)先行麻醉)，再用膠布將鼠前后肢依次固定在蠟板上。尾靜脈注射時(shí)，可用小鼠固定器固定。
3.大鼠 大鼠的抓取基本同小鼠，只不過(guò)大鼠比小鼠牙尖性猛，抓取時(shí)為避免咬傷，可帶上帆布手套。如果進(jìn)行腹腔、肌肉、皮下等注射和灌胃時(shí)，同樣可采用左手固定法，只是用拇指和食指捏住鼠耳，余下三指緊捏鼠背皮膚，置于左掌心中，這樣右手即可進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)操作，也可伸開左手之虎口，敏捷地從后，一把抓住。若做手術(shù)或解剖等，則應(yīng)事先麻醉或處死，然后用細(xì)棉線繩縛腿，背臥位綁在大鼠固定板上。尾靜脈注射時(shí)的固定同小鼠。
4.家兔 抓?。阂话阋杂沂肿プ⊥妙i部的毛皮提起，然后左手托其臀部或腹部，讓其重量的大部分集中在左手上，這樣就避免了抓取過(guò)程中的動(dòng)物損傷。不能采用抓雙耳或抓提腹部。
固定：一般將家兔的固定分為盒式、臺(tái)式。盒式固定(圖3-24)，適用于兔耳采血、耳血管注射等情況。若行血壓測(cè)量、呼吸等實(shí)驗(yàn)和手術(shù)時(shí)，則要將家兔固定在兔臺(tái)上(圖3-25)，四肢用粗棉繩活結(jié)綁住，拉直四肢，將繩綁在兔臺(tái)四周的固定點(diǎn)上，頭以固定夾固定或用一根粗棉繩挑過(guò)兔門齒綁在兔臺(tái)鐵柱上。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物多用于建立不同疾病的動(dòng)物模型。在微生物實(shí)驗(yàn)室中，常常會(huì)建立人感染性(病毒和細(xì)菌)疾病的動(dòng)物模型，在實(shí)驗(yàn)操作上要求更加嚴(yán)格。
1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)須遵循的原則
(1)人道地對(duì)待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，給動(dòng)物創(chuàng)造一個(gè)相對(duì)安靜的環(huán)境，以免動(dòng)物受驚;操作時(shí)動(dòng)作盡量輕柔、小心，以免被咬傷;手術(shù)或處死動(dòng)物時(shí)，以使其少受痛苦為原則。
(2)根據(jù)感染的微生物危險(xiǎn)度選擇造模環(huán)境，并保證其無(wú)菌和獨(dú)立。
(3)整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程均做好操作人員的個(gè)人防護(hù)，避免逆向感染。
(4)感染性動(dòng)物模型飼養(yǎng)環(huán)境要保持相對(duì)隔離狀態(tài)(根據(jù)危險(xiǎn)度評(píng)估結(jié)果決定)。
(5)保證實(shí)驗(yàn)用菌(毒)株為唯一的感染源。
(6)避免對(duì)飼養(yǎng)的外環(huán)境污染。
(7)動(dòng)物尸體及組織應(yīng)嚴(yán)格按照規(guī)定進(jìn)行處理。
2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中潛在的污染(或非正常感染)源
(1)實(shí)驗(yàn)器材，手術(shù)器械、注射器、器皿等。
(2)感染環(huán)境，空氣、臺(tái)面等。
(3)藥物是否儲(chǔ)存正常。
(4)操作者，包括呼吸、操作(注射、給藥、取材等)。
(5)動(dòng)物自身，包括皮毛、糞便等。
3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的無(wú)菌操作
(1)準(zhǔn)備階段
1)實(shí)驗(yàn)所用器皿、手術(shù)器材等進(jìn)行消毒滅菌(需有外包裝)，必要時(shí)使用一次性無(wú)菌用品。
2)清潔消毒操作環(huán)境(空間、臺(tái)面等)。
3)準(zhǔn)備好個(gè)人防護(hù)設(shè)備(乳膠手套、口罩、抓捕手套、隔離衣等)。必要時(shí)(如手術(shù)后動(dòng)物需存活，且要碰觸動(dòng)物內(nèi)臟的手術(shù))須戴無(wú)菌手套進(jìn)行動(dòng)物手術(shù)。戴無(wú)菌手套的原則是未戴手套的手，只允許接觸手套的里面，已經(jīng)戴手套的手只能接觸手套的外面。
(2)實(shí)驗(yàn)階段：實(shí)驗(yàn)步驟：稱重→麻醉→脫毛→鋪洞巾→手術(shù)→縫合→用抗生素抗炎。
1)動(dòng)物無(wú)菌手術(shù)所用的耗材均應(yīng)事先消毒滅菌并烤干，無(wú)菌用品均放置在清潔區(qū)域，避免操作者以外的人接觸。
2)用完的物品要有指定位置存放(即手術(shù)中用過(guò)與未用的物品要分開放置);如要反復(fù)使用(如手術(shù)器械)，應(yīng)做好清潔消毒工作，及時(shí)用75%乙醇消毒。
3)操作者雙手避免接觸污染區(qū)域(如擦眼、擦汗、校正口罩、打手機(jī)等)。
4)有感染性材料存在時(shí)，操作上盡量減少氣溶膠的產(chǎn)生(如離心血清等)。
5)動(dòng)物的手術(shù)、注射等部位要消毒徹底(手術(shù)前需用75%乙醇或碘酒擦拭皮膚，可用適量抗生素撒在手術(shù)傷口縫合處)。
6)頭皮針、注射器用完后套好針頭套(最好準(zhǔn)備一個(gè)放置針頭套的淺容器)，放入銳器盒。
7)灌胃時(shí)檢查灌胃針頭部是否被堵塞，灌胃的藥物應(yīng)事先37℃溫浴，灌胃動(dòng)作要輕柔順暢，防止食道甚至內(nèi)臟受傷。
8)實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物的糞便在清理掉后，要清潔接觸面(必要時(shí)進(jìn)行消毒)。提示：麻醉劑量要適量。
(3)清理階段(按順序清理)
1)動(dòng)物尸體、組織包裝好后按規(guī)定放入指定位置。
2)頭皮針、注射器針頭放入銳器盒后置于指定位置。
3)手術(shù)器械、儀器及其他實(shí)驗(yàn)材料的清理。
4)清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、環(huán)境、動(dòng)物裝置等，用消毒液對(duì)所有用具及臺(tái)面消毒。
5)摘除個(gè)人防護(hù)裝備(先摘手套后摘口罩)，放入指定位置，最后用藥皂洗手。
注意：如有感染性材料，均要行消毒滅菌處理。
