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疾病預(yù)防控制中心對PCR 實驗室都有那些要求?
發(fā)布:admin 發(fā)布時間:2021-08-16 15:39:54 瀏覽:
實驗室依據(jù)所使用的方法可分為試劑準備、標本制備、擴增、產(chǎn)物分析等三或四個區(qū)域。只是使用實時熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實驗室,有上述前面三個區(qū)域即可。各區(qū)域應(yīng)完全獨立分隔,不應(yīng)有任何的空氣直通。
產(chǎn)物分析區(qū)
產(chǎn)物分析區(qū)或三個區(qū)域的最后一個區(qū)域(即擴增及產(chǎn)物分析區(qū)),空氣流向應(yīng)由室外向室內(nèi),可通過在室內(nèi)設(shè)置通風櫥、排風扇或其他排風系統(tǒng)達到空氣流由室外向室內(nèi)流動的要求。
各區(qū)域儀器設(shè)備配備
PCR實驗室各區(qū)域儀器設(shè)備配備通常如下:
1、 試劑準備區(qū):
儀器設(shè)備主要應(yīng)有加樣器、冰箱、天平、低速離心機、混勻器、可移動紫外燈等。可使用超凈工作臺作為試劑配制操作臺面。
2、 標本制備區(qū)
儀器設(shè)備主要應(yīng)有生物安全柜(最好為B2, 可避免提取核酸在柜內(nèi)反復(fù)循環(huán),造成標本間交叉“污染”,出現(xiàn)假陽性結(jié)果。此外還應(yīng)配備加樣器、臺式高速離心機(冷凍及常溫)、臺式低速離心機、恒溫設(shè)備(水浴和/或干浴儀)、冰箱、混勻器和可移動紫外燈等。
3、 擴增區(qū)
主要儀器就是核酸擴增熱循環(huán)儀(PCR儀,實時熒光或普通的)。熱循環(huán)儀的電源應(yīng)專用,并配備一個穩(wěn)壓電源或UPS,以防止由于電壓的波動對擴增測定的影響。此外,根據(jù)工作需要,還可配備加樣器、超凈臺等。
4、 產(chǎn)物分析區(qū):
本區(qū)所使用的儀器設(shè)備可能有加樣器、電泳儀(槽)、電轉(zhuǎn)印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測序儀、酶標儀和洗板機等。
在理想情況下,PCR實驗室試劑準備、標本制備、擴增三個區(qū)域可設(shè)置緩沖間。在緩沖間內(nèi),可設(shè)置正壓,使室內(nèi)空氣不流向室外,室外空氣不流向室內(nèi)。